Левзея п инструкция: Левзея П таблетки №100 купить в Москве по цене от 163 рублей

Левзея П — инструкция по применению

Инструкция:

  • Форма выпуска
  • Состав
  • Применение
  • Противопоказания
  • Рекомендации по применению
  • Особые указания
  • Условия хранения
  • Срок годности
  • Условия реализации
  • Классификация

Форма выпуска

Таблетки массой 0,205 г.

Состав

Порошок корневищ с корнями левзеи сафлоровидной, кислота аскорбиновая, E470, E171, E461, E433, E128.

Применение

Для реализации населению в качестве биологически активной добавки к пище — дополнительного источника витамина C, источника флавоноидов и дубильных веществ.

Противопоказания

Повышенная нервная возбудимость, бессонница, повышенное артериальное давление, нарушение ритма сердечной деятельности, выраженный атеросклероз, беременным и кормящим женщинам, приём в вечернее время, индивидуальная непереносимость компонентов.

Рекомендации по применению

Взрослым по 2–3 таблетки 3 раза в день во время еды. Продолжительность приёма 2–3 недели.

Особые указания

Перед применением рекомендуется проконсультироваться с врачом.

Условия хранения

Хранить в сухом, защищённом от света месте при комнатной температуре.

Срок годности

2 года.

Условия реализации

Места реализации определяются национальным законодательством государств-членов Евразийского экономического союза.

Классификация

  • Группа

    Другие БАДы

Поделиться этой страницей

Подробнее по теме

Ознакомьтесь с дополнительными сведениями о биологически активной добавке Левзея П:

  • Формы выпуска (2)
  • Отзывы
  • Вопросы

Информация о биологически активной добавке Левзея П предназначена для медицинских и фармацевтических специалистов, исключительно в справочных целях. Инструкция не предназначена для замены профессиональной медицинской консультации, диагностики или лечения. Содержащаяся здесь информация может меняться с течением времени. Наиболее точные сведения содержатся в инструкции производителя, прилагаемой к упаковке БАД.

цена с доставкой в каталоге интернет аптеки АлтайМаг


Применяется в народной медицине Сибири. Местным жителям давно известно, что олени-маралы, коровы и лошади разыскивают это растение и усиленно его поедают. Еще в позапрошлом веке было замечено, что левзея благотворно действует на человеческий организм. О левзее в народе говорят, что она «поднимает человека от четырнадцати болезней и наливает его молодостью”.


 


Это растение обладает хорошим тонизирующим, возбуждающим действием. Снимает чувство утомления и усталости при физической и умственной работе, восстанавливает бодрость, повышает аппетит, значительно усиливает работоспособность, улучшает общее самочувствие и усиливает действие половых желез, способствуя восстановлению половой функции.

Левзея П – действие:


Обладает хорошим тонизирующим, возбуждающим действием. Снимает чувство утомления и усталости при физической и умственной работе, восстанавливает бодрость, повышает аппетит, значительно усиливает работоспособность, улучшает общее самочувствие и усиливает действие половых желез, способствует восстановлению половых функций.

Левзея П – показания:


Служит для адаптации к повышенным физическим и умственным нагрузкам, усиления работоспособности, восстановления бодрости.


Дополнительный источник витамина С, флавоноидов и дубильных веществ.

Левзея П — способ употребления:


Взрослым по 2-3 таблетки 3 раза в день во время еды. Принимать 2-3 недели.

Левзея П — побочные действия и противопоказания:


Индивидуальная непереносимость компонентов, повышенная нервная возбудимость, бессонница, повышенное артериальное давление, нарушение ритма сердечной деятельности, выраженный атеросклероз, беременность и кормление грудью, прием в вечернее время. Перед употреблением рекомендуется проконсультироваться с врачом.

Состав


Корень левзеи, витамин С, лактоза, двуокись титана, метилцеллюлоза, кальция стеарат, краситель пищевой кислотный красный.

Назначение

  • Склероз
  • Стресс

Категории

  • Вредные привычки
  • Нервная система заболевания

Характеристики:

  • Срок годности: 14.07.2024
  • Страна производитель: Россия
  • Период срока годности: 24 мес.
  • Количество в коробке: 35
  • Товар на официальном сайте производителя: Смотреть
  • Вес товара: 0.06 кг
  • Штрих-код: 4605920000220
  • Купите Левзея П, 100 табл. в Москве по доступной цене 317 ₽ с доставкой на дом или заберите Ваш заказ в Москве из ближайшего пункта выдачи, сделав заказ на AltaiMag.ru.
  • В карточке товара находится: описание, инструкция по применению, отзывы и сертификаты.
  • Ближайший к вам пункт выдачи заказов в городе Москва вы можете посмотреть здесь.
  • Чтобы купить Левзея П, 100 табл. совершите всего несколько шагов: укажите количество продукта и нажмите на кнопку «Купить».

Информация о технических характеристиках, комплекте поставки, стране изготовления, внешнем виде и цвете товара носит справочный характер и основывается на последних доступных сведениях от производителя

Левзея | Bonapeti.com

Левзея сафлоровидная — растение, произрастающее в Сибири и Северо-Восточной Азии. Левзея внешне напоминает чертополох, но не имеет к нему никакого отношения.

Левзея – высокоэнергетическое растение, которое помогает успешно справиться с весенней усталостью, депрессией и половой слабостью. Растение имеет высоту от 20 до 50 дюймов (от 50 до 120 см) и имеет крепкие зазубренные листья.

Лечебные свойства левзеи были обнаружены после наблюдения за северными оленями в период размножения, которые пытались полакомиться корнями левзеи.

Состав левзеи

С лечебной целью используют хорошо очищенные от пыли и высушенные корни травы. Они содержат витамины, из которых наибольшее количество витамина С, дубильные вещества, эфирные масла, смолы и эфирные вещества. В составе левзеи тоже есть экдистероны.

Экдистерон относится к классу тритерпеноидов вместе с известными агентами, такими как фитостеролы и тритерпеновые сапонины. Известно более 250 различных экдистеронов. Некоторые химики считают, что это число вырастет до тысячи.

Выбор и хранение левзеи

Экстракт левзеи можно найти на этикетках многих комбинированных или травяных добавок от усталости. Он используется в формулах для борьбы со стрессом. Экстракт также содержится в восстанавливающих веществах после тренировки и растительных добавках для стимуляции роста.

Ежедневное потребление левзеи

Подсчитано, что 40 мг чистого экстракта экдистерона в день достаточно для положительных результатов без риска отравления. Вы должны следовать инструкциям на упаковке для рекомендуемой суточной дозы возможных различий в концентрации экстрактов в отдельных продуктах.

Преимущества левзеи

Левзея — это адаптоген, который помогает организму реагировать на стресс и, таким образом, лучше справляться с ним. Это свойство связано с бета-экдистероном экдизоном. Левзея является стимулятором роста мышц и является очень хорошим анаболиком.

Это отличный поставщик энергии, который повышает физическую выносливость, половое влечение и сексуальную активность.

Улучшает умственную деятельность и кровообращение, лечит депрессию и улучшает настроение, снимает стресс. Левзея улучшает деятельность печени и нормализует содержание гемоглобина в крови.

Стимулирует рост мышц и сжигает лишний жир, поэтому рекомендуется для активных людей, которые хотят иметь спортивное тело. Левзея поддерживает восстановление после инфекционных заболеваний, тяжелого физического труда, напряженных тренировок или менопаузы.

Левзея – мощный антиоксидант, ограничивающий вредное воздействие свободных радикалов на клетки и тем самым предотвращающий их преждевременное старение. Обладает очень хорошими иммунными эффектами, поэтому рекомендуется при простуде, гриппе и инфекционных заболеваниях.

Среди предположений и бездоказательных утверждений о положительном действии левзеи есть то, что она снижает уровень холестерина, снижает артериальное давление и стимулирует синтез гемоглобина в эритроцитах.

Вред левзеи

Прежде чем начать принимать экстракты левзеи или экдистерона, рекомендуется проконсультироваться с врачом. Считается, что трава немного токсична, но переносится большинством людей.

Из-за присутствия в нем экдистерона левзея не должна использоваться беременными или кормящими женщинами. Не рекомендуется прием экдистерона и левзеи людям, принимающим анаболические стероиды и гормоны роста без консультации специалистов-андрологов.

При длительном приеме чрезмерных доз некоторых видов экдистерона может наблюдаться увеличение молочных желез, огрубение голоса и усиленный рост волос, а также увеличение риска развития рака предстательной железы и молочной железы.

Специфический гидролиз и накопление антипролиферативных лигнанов в плодах левзеи сафлоровидной (Willd.) DC.

Эта статья была загружена: [Mount Allison University 0Libraries] Дата: 04 сентября 2014 г., время: 02:04 Издатель: Taylor & Francis Informa Ltd Зарегистрировано в Англии и Уэльсе Регистрационный номер: 1072954 Юридический адрес: Mortimer House, 37-41 Mortimer Street, London W1T 3JH, UK

Natural Product Research: Formerly Natural Product Letters Сведения о публикации, включая инструкции для авторов и информацию о подписке: http://www.tandfonline.com/loi /gnpl20

Специфический гидролиз и накопление антипролиферативных лигнанов в плодах левзеи сафлоровидной (Willd.) DC. a

b

c

Анна Соломвари, Жолт Мерваи, Иболья Молнар-Перл и Имре a

Boldizsár a

Кафедра анатомии растений, Институт биологии, Университет Этвеша Лоранда, Pázmány Péter sétány 1/C, Budapest 1117, Венгрия b

Первая кафедра патологии и экспериментальных исследований рака, Университет Semmelweis, Üllői út 26, Будапешт 1085, Венгрия c

Кафедра аналитической химии, Институт химии, Университет Этвеша Лоранда, Пазмани Петер Сетани 1/C, Будапешт 1117, Венгрия Опубликовано онлайн: 31 января 2014 г.

Ibolya Molnár-Perl & Imre Boldizsár (2014) Специфический гидролиз и накопление антипролиферативных лигнанов в плодах левзеи сафлоровидной (Willd.) DC., Natural Product Research: Formerly Natural Product Letters, 28:10, 732-739, DOI: 10.1080/14786419.2013.879473 Ссылка на эту статью: http://dx.doi.org/10.1080/14786419.2013.879473

ПОЖАЛУЙСТА, ПРОКРУТИТЕ ВНИЗ ДЛЯ СТАТЬИ Тейлор и Фрэнсис делают все возможное, чтобы обеспечить точность всей информации («Контент»), содержащиеся в публикациях на нашей платформе. Тем не менее, Taylor & Francis, наши агенты и наши лицензиары не делают никаких заявлений или гарантий относительно точности, полноты или пригодности Контента для каких-либо целей. Любые мнения и взгляды, выраженные в этой публикации, являются мнениями и взглядами авторов, а не взглядами или взглядами Taylor & Francis. На точность Контента нельзя полагаться, и она должна быть независимо проверена с помощью первичных источников информации. Тейлор и Фрэнсис не несут ответственности за какие-либо убытки, действия, претензии, разбирательства, требования, затраты, расходы, убытки и другие обязательства любого рода. 0005

или по какой-либо другой причине, возникающей прямо или косвенно в связи, в отношении или в результате использования Контента.

Загружено [Mount Allison University 0Libraries] в 02:04 04 сентября 2014 г.

Эта статья может быть использована в исследовательских, учебных и личных целях. Любое существенное или систематическое воспроизведение, перераспределение, перепродажа, предоставление во временное пользование, сублицензирование, систематическая поставка или распространение в любой форме кому бы то ни было категорически запрещено. Условия доступа и использования можно найти по адресу http://www.tandfonline.com/page/termsand-conditions

Исследование натуральных продуктов, 2014 г. Том. 28, № 10, 732–739, http://dx.doi.org/10.1080/14786419.2013.879473

Специфический гидролиз и накопление антипролиферативных лигнанов в плодах левзеи сафлоровидной (Willd.) DC. Анна Соломварья, Жолт Мервайб, Иболья Молнар-Перлк и Имре Болдиссаара*

Загружено [0Libraries Университета Маунт Эллисон] в 02:04 04 сентября 2014 г.

a

Кафедра анатомии растений, Институт Биологии, Университет Йотвос Лоранд, Пазмани Петер сетаньи 1/С, Будапешт 1117, Венгрия; bПервое отделение патологии и экспериментальных исследований рака, ¨llo˝i u´t 26, Будапешт 1085, Венгрия; cКафедра аналитической химии, Университет Земмельвайса, Институт химии Университета Этвеш Лоранд, Пазмани Петер сетани 1/С, Будапешт 1117, Венгрия (Поступила 16 сентября 2013 г.; окончательная версия получена 24 декабря 2013 г.) В плодах левзеи сафлоровидной методами ЖХ-УФ, ЖХ-МС/МС и методы ГХ-МС. Анализировали состав зародышевых и стеночных частей плодов до и после их гидролиза. В результате этих исследований было подтверждено специфическое накопление лигнановых гликозидов и ферулоил-серотонинов в части плода, что свидетельствует о том, что зародыш содержит большое количество лигнановых гликозидов (трахелозид 32,9).мг/г, картамозид 45,3 мг/г), а в пристеночной части плода накапливаются ферулоил-серотонины (63,0 мг/г). Ферментативный гидролиз зародыша привел к количественному превращению гликозидов лигнанов в соответствующие им агликоны, что позволило селективно выделить трахелогенин и картамогенин. Эти агликоны подвергали антипролиферативному исследованию против клеточной линии аденокарциномы толстой кишки SW480. В этом тесте в диапазоне концентраций 22–185 мМ была продемонстрирована умеренная активность картомогенина и значительный эффект трахелогенина. Ключевые слова: левзея; анализ лигнанов; картомогенин; трахелогенин; арктигенин; антипролиферативное действие

1. Введение Подземные органы (корни и корневища) левзеи сафлоровидной (Willd.) DC. растения (семейство сложноцветных) широко используются в народной медицине из-за их адаптогенного действия. Фитохимические исследования корней и корневищ левзеи выявили наличие фитостеролов в качестве основных активных веществ (Кокоска и Яновска, 2009). Помимо фитостеролов, в семенах этого растения также были описаны изомеры ферулоил-серотонина, гликозиды лигнанов дибензилбутиролактонного типа (трахелозид и картамозид) и соответствующие им агликоны (трахелогенин и картамогенин), но без количественных данных (Harmatha et al. 2007). Что касается важности этих лигнанов, противораковая активность in vitro была продемонстрирована для трахелозида и трахелогенина, выделенных из Saussurea salicifolia (Kang et al. 2007) и Trachelospermum jasminoides (Zhu et al. 2013). Эти результаты показали, что агликон трахелогенин более эффективен, чем его гликозид. Кислотный или ферментативный гидролиз гликозидов лигнанов имеет большое значение для получения их более эффективных агликонов (Szokol-Borsodi et al. 2012).

* Автор, ответственный за переписку. Электронная почта: [email protected] q 2014 Taylor & Francis

Загружено [Mount Allison University 0Libraries] в 02:04 04 сентября 2014 г.

Исследование натуральных продуктов

733

Было обнаружено, что плоды семянки отделяются от внешней древесной плодовая стенка и внутренний зародышевый отдел. Недавно было продемонстрировано, что гликозиды лигнанов могут быть обнаружены в зародыше в качестве основного компонента семянок некоторых видов растений, что позволяет выделить сырье с высоким содержанием гликозидов лигнанов, подходящее для гидролиза или выделения (Szokol-Borsodi). и др., 2012). Цели этого исследования заключались в том, чтобы (i) определить состав лигнановых гликозидов/агликонов и ферулоилсеротонина в плодах и частях плодов L. carhamoides с применением методов ЖХ-УФ, ЖХ-МС/МС и ГХ-МС, (ii) прояснить характеристики трансформации этих соединений в процессах ферментативного и кислотного гидролиза, (iii) использовать ткани плодов с оптимальным составом агликонов лигнанов для их селективного выделения и (iv) исследовать эффективность выделенных агликонов лигнанов против аденокарциномы толстой кишки SW480 клеточная линия.

2. Результаты и обсуждение 2.1. Идентификация компонентов Для идентификации соединений, основываясь на нашем предыдущем опыте анализа растительных лигнанов, использовались онлайн методы ЖХ-УФ и ГХ-МС, а в случае изолированных, чистых соединений использовались методы ЖХ-МС/МС (Sedla´k и др., 2008; Болдиссаар и др., 2010a, 2010b, 2012; Сокол-Борсоди и др., 2012). Вводный ЖХ-УФ-анализ экстракта цельных плодов привел к шести отдельным соединениям (рисунок 1 и дополнительный рисунок S1A, пики 1–6), которые были выделены с помощью препаративной жидкостной хроматографии.1 Оценивая ЖХ-МС-спектры этих выделенных соединений, они были идентифицированы как катионированные молекулярные ионы аммония (дополнительный рисунок S2, спектры 1A, 2A, 5A, 6A) для гликозидов лигнанов (трахелозид: 1, картамозид: 2), их агликоны (трахелогенин: 5, картамогенин: 6) и как протонированные молекулярные ионы изомеров ферулоил-серотонина (3, 4) (спектры не показаны). Для выяснения структуры по поведению фрагментации этих молекулярных ионов были применены три различных энергии диссоциации, вызванной столкновением (CID) [указанные в напряжениях электронов (эВ)]; данные показаны на дополнительном рисунке S2 в сериях, полученных при 10, 15 и 20 эВ в спектрах 1B, 2B, 5B, 6B, в 1C, 2C, 5C, 6C и в 1D, 2D, 5D, 6D. Оценка

Рисунок 1. Структуры гликозидов лигнанов дибензилбутиролактонного типа (трахелозид и картамозид), их агликонов (трахелогенин и картамогенин) и изомеров ферулоил-серотонина, обнаруженных в плодах левзеи. Номера этих соединений (в скобках) соответствуют номерам, показанным на дополнительной фигуре S1.

734

A. So´lyomva´ry et al.

Загружено [Mount Allison University 0Libraries] в 02:04 04 сентября 2014 г. ), может стабилизироваться за счет потери молекул h3O по двум различным схемам (схемы i и ii). (i) Трахелозид (дополнительный рисунок S3, схема 1) и трахелогенин (дополнительный рисунок S3, схема 2) превращаются в картамозид и картомогенин, в результате чего образуются те же ионы фрагментов, которые наблюдаются при фрагментации картамозида и картомогенина (дополнительный рисунок S3, Frs b, e и f, соответствующие ионам m/z 151, m/z 219и m/z 247 на рисунке S2). (ii) Альтернативный характерный путь, также связанный с элиминацией h3O трахелозида (дополнительная фигура S3, схема 3) и трахелогенина (дополнительная фигура S3, схема 4), привел к открытию лактонового кольца, обеспечивающему характерные фрагментные ионы для трахелозида (m /z 533: дополнительная фигура S2, спектр 1B; фигура S3, Fr g) и трахелогенин (m/z 371: дополнительная фигура S2, спектры 5B, 5C; фигура S3, Fr c и m/z 343: дополнительная фигура S2, спектры 5В, 5С, рисунок S3, Пр г). Этот процесс фрагментации был описан ранее для пятичленных лактонов (Crotti et al. 2004). Относительно УФ-спектров пары трахелозид/трахелогенин (дополнительный рисунок S4A/C, максимальные значения: 281/282 нм), батохромного сдвига пар картамозид/картамогенин (дополнительный рисунок S4B/D, максимальные значения: 325/332 нм) оказались характерными для сопряженной системы (рис. 1). Кроме того, идентичность трахелозида и трахелогенина была подтверждена прямым сравнением с поведением ЖХ-МС этих лигнанов, выделенных ранее в качестве аутентичных стандартов (Boldizsa´r et al. 2010b). Идентификация изомеров ферулоил-серотонина была основана на их протонированном молекулярном ионе m / z 353 и их характерном фрагментном ионе m / z 177 (дополнительная фигура S3, соединения 3 + 4), полученном при CID 10–20 эВ (спектры МС не показаны) . Идентификация фруктовых компонентов, выполненная с помощью ГХ-МС, в качестве их триметилсилильных производных (дополнительная фигура S5) была основана на нашем предыдущем опыте анализа лигнанов (Sedla´k et al. 2008; Boldizsa´r et al. 2010a, 2010b, 2012) . В рамках этих исследований в общей сложности было одновременно идентифицировано 17 фруктовых соединений за один прогон (дополнительная фигура S5A), включая виды, идентифицированные ранее, такие как органические кислоты, сахара и производные стерола (Boldizsa´r et al. 2006, 2011, 2013; Седлак и др., 2008). Результаты анализов ГХ-МС подтвердили идентичность трахелогенина, картамогенина, трахелозида и картамозида (соединения 11, 13, 15 и 17 на дополнительных рисунках S5A, S5C и S5D). Помимо этих лигнанов, четыре изомера хлорогеновой кислоты (дополнительные рисунки S5A, 7, 9, 10, 12 и S5C), о которых до сих пор сообщалось только в подземных органах L. carthamoides (Kokoska & Janovska 2009), и были идентифицированы производные стерола (дополнительные рисунки S5A и S5C, соединение 8). Кроме того, пять сахаров (дополнительный рисунок S5A, фруктоза 1a, 1b; глюкоза 2a, 2b; сахароза 6; два трисахарида 14, 16), две жирные кислоты (линолевая кислота 4; стеариновая кислота 5) и инозитол (3), что является обычным также были обнаружены соединения плодов семянки (Boldizsa´r et al. 2010a). 2.2. Влияние кислотного и ферментативного гидролиза на состав лигнана и ферулоил-серотонина Сравнивали состав лигнана и ферулоил-серотонина негидролизованных, кислотных и ферментативно гидролизованных фруктовых экстрактов. Были использованы три разных времени гидролиза (30, 60 и 120 минут), а за результатами следили ЖХ-УФ (дополнительная фигура S6). Рассматривая поведение лигнанов при кислотном и ферментативном гидролизе, было продемонстрировано, что оба

Загружено [Mount Allison University 0Libraries] в 02:04 04 сентября 2014 г. (Дополнительный рисунок S6). В то время как для полного кислотного гидролиза требовалось всего 30 минут, для количественного ферментативного гидролиза требовалось 120 минут. Следовательно, это время гидролиза было использовано для анализа образцов отделенных плодовых стенок и зародышей (см. раздел 2.3). Хотя для ферментативного гидролиза требовалось больше времени, чем для кислотного гидролиза, ферментативный процесс был чрезвычайно избирательным; этот процесс не влиял на количество изомеров ферулоил-серотонина. Однако кислотная обработка приводила к их разложению на неопределенные продукты. Анализ ГХ-МС продемонстрировал влияние селективного ферментативного гидролиза на составляющие фруктов (дополнительные рисунки S5A и S5B). Превращение лигнановых гликозидов в их агликоны сопровождалось образованием глюкозы, если сравнивать хроматограммы негидролизованных (дополнительная фигура S5A) и ферментативно гидролизованных (дополнительная фигура S5B) образцов фруктов. Помимо селективности ферментативного гидролиза, его реализация была проще, чем у кислотного гидролиза (см. раздел 3). Соответственно, ферментативный гидролиз был оптимальным выбором для трансформации гликозидов лигнанов с целью выделения их агликонов. 2.3. Раздельное накопление лигнанов и ферулоил-серотонинов в частях стенки и зародыша плодов семянки. Сравнивали состав лигнана и ферулоил-серотонина целых плодов, частей зародыша и стенки (дополнительные рисунки S1A, S1B и S1C, данные в скобках). Как видно, гликозиды лигнанов (трахелозид и картамозид) накапливались в основном в зародышевой части плода (дополнительный рисунок S1B, трахелозид 6,0 ммоль/100 г соответствует 32,9мг/г и картамозид 8,5 ммоль/100 г соответствует 45,3 мг/г), в то время как изомеры ферулоил-серотонина были обнаружены исключительно в стенке плода (дополнительная фигура S1C, 17,9 ммоль/100 г соответствует 63,0 мг/г). Это раздельное накопление лигнановых гликозидов и ферулоил-серотонинов, называемое «накоплением, специфичным для частей плодов», обеспечивает сырье с относительно высоким количеством соединений для их выделения без примесей. Стоит подчеркнуть, что как ферментативный (дополнительный рисунок S1E), так и кислотный (дополнительный рисунок S1H) гидролиз образцов эмбрионов приводил к количественному превращению гликозидов лигнанов в их агликоны. Поскольку ферментативный гидролиз оказался более предпочтительным по сравнению с кислотным гидролизом (см. раздел 2.2.), трахелогенин и картамогенин были выделены из ферментативно гидролизованной эмбриональной ткани с помощью препаративной ЖХ. В дополнение к ферулоил-серотонинам в стенке плода картамозид также был обнаружен в качестве второстепенного соединения с близким удержанием ферулоил-серотонинов (дополнительный рисунок S1C, пики 2, 3, 4). Из-за того факта, что ферментативный гидролиз части стенки плода привел к исчезновению картамазида, гидролизованная ферментом ткань стенки оказалась оптимальным источником для выделения ферулоил-серотонинов (дополнительный рисунок S1F, пики 3, 4). . В результате этих результатов, то есть комбинации накопления лигнанов/ферулоил-серотонинов в части плода и ферментативного гидролиза, стало возможным выделить (i) гликозиды лигнанов из негидролизованного зародыша, (ii) их агликоны из ферментативно гидролизованный зародыш и (iii) ферулоил-серотонины из ферментативно гидролизованных экстрактов плодовых стенок с использованием препаративной ЖХ (см. раздел 3.6). 2.4. Антипролиферативная активность агликонов лигнанов из плодов L. carthamoides в отношении клеточной линии аденокарциномы толстой кишки SW480 На основании литературных данных было продемонстрировано, что агликон трахелогенин более эффективен в некоторых противоопухолевых тестах, чем его гликозид (Kang et al. 2007; Чжу и др., 2013). 95,9 (185 мМ картомогенин).

Соответственно, мы исследовали антипролиферативное действие агликонов лигнанов (трахелогенина и картамогенина), выделенных из ферментативно гидролизованных зародышей плодов L. carthamoides (рис. 2). В качестве положительного контроля мы использовали арктигенин, агликон лигнана со скелетом типа дибензилбутиролактона, такой как трахелогенин и картомогенин. Кроме того, недавно была продемонстрирована активность арктигенина в отношении нескольких типов рака, включая выбранную клеточную линию аденокарциномы толстой кишки SW480 (Yoo et al. 2010). Наше сравнительное исследование также подтвердило антипролиферативную активность арктигенина в отношении этого типа раковых клеток (рис. 2) наряду с умеренным антипролиферативным эффектом картамогенина. Трахелогенин проявлял наиболее значительную активность в диапазоне применяемых концентраций. Что касается механизма антипролиферативного действия трахелогенина, то недавно было продемонстрировано его ингибирующее влияние на сигнальный путь ядерного фактора kB (NF-kB) в клетках HepG2 (Zhu et al. 2013). Однако механизм его действия в клетках SW480 еще предстоит определить. 3. Экспериментальный 3.1. Общие экспериментальные методики и инструменты. Для идентификации использовались методы ГХ-МС и ОФ-ЖХ-ИЭР-МС/МС, для количественного определения ОФ-ЖХ-УФ и для выделения препаративного ОФ-ЖХ. Для хроматографических методов мы использовали тот же аппарат и условия, которые были описаны ранее (Boldizsa´r et al. 2010b). 3.2. Растительный материал и химические вещества. Подлинные образцы плодов L. carhamoides (Willd.) DC. были получены из Научно-исследовательского института лекарственных растений, Будакалаш, Венгрия. Ваучерный образец этих плодов (LC2013-001) был депонирован на кафедре анатомии растений Университета Йотвос Лоранд, Будапешт, Венгрия. Материалы и реагенты, применяемые при приготовлении, гидролизе и хроматографии фруктовых компонентов, были аналитической чистоты самой высокой доступной чистоты. Среда RPMI-1640 (R8758), пенициллин-стрептомицин (P4458), эмбриональная бычья сыворотка (FBS; F9665), сульфородамин В (SRB; S9012) и арктигенин были приобретены у Sigma Aldrich (Сент-Луис, США). 3.3. Приготовление растительных экстрактов. Лиофилизированные, измельченные и гомогенизированные образцы растений (0,02 г навески с аналитической точностью) экстрагировали три раза. Сначала их экстрагировали 2 мл 80% (об./об.) метилового спирта, выдерживая при температуре кипения с обратным холодильником в течение 60 мин. После этого нерастворимый отцентрифугированный материал экстрагировали второй и третий раз, как описано ранее. Объединенные супернатанты доводили до 10,0 мл маточных растворов. Различные разведения исходного раствора готовили с использованием 80% (об./об.) метилового спирта и подвергали анализу ЖХ-УФ и ЖХ-ESI-MS/MS. Аликвоты маточных растворов, высушенных на вакуумном испарителе (30–40°С), анализировали методом ГХ-МС. Отныне образцы используются для различных аналитических методов. 3.4. Проведение кислотного гидролиза. Аликвоты исходных растворов (0,25–1,00 мл) упаривали досуха на вакуумном испарителе при 30–40°С в 4-мл флаконах с завинчивающимися крышками. Гидролиз проводили с 500 мл 2 М трифторуксусной кислоты при 100°С, применяя время гидролиза 30, 60 или 120 мин. Гидролизованные образцы высушивали в вакуум-выпарном аппарате (при 30–40°С). Гидролизованные образцы были обозначены как Ас-30 – Ас-120 и использовались для различных аналитических методов. 3.5. Проведение гидролиза эндогенными ферментами Лиофилизированные, измельченные и гомогенизированные образцы растений (0,02 г навески с аналитической точностью) суспендировали в 1,0 мл дистиллированной воды. Суспензии перемешивали при 200 об/мин при 40°С в течение 30, 60 и 120 мин, применяя термостабильную магнитную мешалку (Ikamag RH, Janke and Kunkel GmbH). После этого образцы лиофилизировали и экстрагировали в соответствии с протоколом, подробно описанным в разделе 3. 3. Гидролизованные образцы были обозначены как Enz-30 – Enz-120 и использовались для различных аналитических методик. 3.6. Выделение компонентов Для выделения лигнановых гликозидов, их агликонов и ферулоил-серотонинов экстрагировали соответственно негидролизованные зародыши, ферментативно гидролизованные зародыши и негидролизованные ткани стенок (процессы экстракции и гидролиза описаны в разделах 3.3 и 3.5). Высушенные экстракты (вакуумный испаритель, 30–40°С) восстанавливали в 1,0 мл 80% (об./об.) метилового спирта и очищали препаративной ЖХ в виде аликвот по 200 мл. Аппаратура и условия подробно описаны в другом месте (Boldizsa´r et al. 2010b). Объединенные элюаты, содержащие выбранные чистые соединения, высушивали в вакуумном испарителе (при 30–40°С). Эти выделенные соединения использовали для аналитических тестов и анализа пролиферации. 3.7. Анализ пролиферации Пролиферацию клеток исследовали на клеточной линии аденокарциномы толстой кишки SW480, полученной из Американской коллекции типовых культур (CCL 228). Клетки культивировали во влажной атмосфере, содержащей 5% CO2, при 37°C в среде Roswell Park Memorial Institute (RPMI) с добавлением 10% FBS, 100 ед/мл пенициллина и 100 мг/мл стрептомицина. Для анализа пролиферации клетки высевали в 96-луночные планшеты с плотностью 3000 клеток/лунку, содержащие арктигенин, картамогенин и трахелогенин, каждый в трех различных концентрациях (22, 66 и 185 мМ). Контрольные клетки инкубировали в культуральной среде. Для отслеживания пролиферации клеток использовали колориметрический анализ SRB. Клетки фиксировали 10% (вес/объем) трихлоруксусной кислоты и окрашивали 50 мл SRB в течение 30 минут с последующим повторным промыванием 1% (об/об) уксусной кислотой для удаления избытка красителя. Связанный с белком краситель растворяли в 10 мМ Tris base 9.0005

738

A. So´lyomva´ry et al.

Загружено [Mount Allison University 0Libraries] в 02:04 04 сентября 2014 г.

раствор и абсорбция измерялись через 48 часов после посева при 570 нм с использованием планшет-ридера Multiskan MS ELISA (A. A. Lab Systems, Рамат-Ган, Израиль). . Ингибирование пролиферации клеток аденокарциномы толстой кишки SW480 агликонами лигнана выражали в процентах, рассчитанных по следующей формуле: 100–100 £ A/B, где A и B представляют собой поглощение в лунках, обработанных лигнаном, и в контрольных лунках соответственно. 4. Заключение В качестве нового вклада в эту область было применено накопление лигнанов и ферулоилсеротонинов в частях плодов левзеи в сочетании с ферментативным гидролизом для выделения этих соединений в чистой форме для их дальнейшего анализа и антипролиферативных тестов. В дополнение к онлайн-анализу ГХ-МС характерные картины фрагментации соединений, исследованных методом ЖХ-МС/МС, использовались для определения их структуры. Было обнаружено, что агликоны лигнанов, картамогенин и трахелогенин, выделенные из ферментативно гидролизованных зародышевых частей плодов, и арктигенин в качестве контрольного лигнана ингибируют пролиферацию клеточной линии аденокарциномы толстой кишки SW480 со значительной разницей в их эффективности; трахелогенин оказался наиболее эффективным. Дополнительный материал Дополнительный материал, относящийся к этой статье, доступен в Интернете вместе с рисунками S1–S6. Благодарности Авторы благодарны профессору Илоне Ковальски и доктору Корнелии Баги за ценные советы при подготовке этой статьи.

Примечание 1. Выделение проводили из выбранных тканей плодов; см. Раздел 2.3, параграфы 1 – 3.

Ссылки Boldizsa´r I, Fu¨zfai Zs, Molna´r-Perl I. 2011. Характерные модели фрагментации триметилсилил- и триметилсилилоксимпроизводных растительных дисахаридов, полученные с помощью газовой хроматографии, связанной с ионом масс-спектрометрия с ловушкой. Дж. Хроматогр А. 1218:7864–7868. Boldizsa´r I, Fu¨zfai Zs, Molna´r-Perl I. 2013. Характеристика эндогенных ферментативных гидролизов гликозидов Petroselinum crispum: определено хроматографией на их продуктах сахара и флавоноидов. J Хроматогр А. 1293: 100–106. Болдизар И., Фузфаи Зс, Тот Ф., Седлак Э., Борсоди Л., Молнар-Перл И. 2010a. Масс-фрагментационное исследование триметилсилильных производных арктиина, матаирезинозида, арктигенина, филлигенина, матаирезинола, пинорезинола и метиларктигенина: их газовая и жидкостная хроматография в растительных экстрактах. J Chromatogr A. 1217:1674– 1682. Boldizsa´r I, Kraszni M, To´th F, Nosza´l B, Molna´r-Perl I. 2010b. Дополнительный анализ картины фрагментации с помощью газовой хроматографии-масс-спектрометрии и жидкостной хроматографии в тандемной масс-спектрометрии подтвердил высокое содержание лигнана в сорняках Cirsium. Дж Хроматогр А. 1217: 6281–6289. Болдиссаар И., Красни М., Тот Ф., Тот Г., Сольомвари А., Носзаль Б., Зарай Гы, Молнар-Перл И. 2012. Роль гармонизированного газа и жидкостная хроматография-масс-спектрометрия при обнаружении неолигнана баланофонина в стенке плода Cirsium vulgare. Дж. Хроматогр А. 1264:143–147. Boldizsa´r I, Szucs Z, Fu¨zfai Zs, Molna´r-Perl I. 2006. Идентификация и количественная оценка компонентов корня марены с помощью газовой хроматографии и высокоэффективной жидкостной хроматографии. Дж Хроматогр А. 1133:259– 274. Crotti AEM, Fonseca T, Hong H, Staunton J, Galembeck SE, Lopes NP, Gates PJ. 2004. Механизм фрагментации пятичленных лактонов с помощью тандемной масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением. Международный J Масс-спектр. 232: 271–276. Хармата Дж., Будейнский М., Вокац К., Павлик М., Грюнер К., Лаудова В. 2007. Лигнановые глюкозиды и серотониновые фенилпропаноиды из семян левзеи сафлоровидной. Собрать Чехословскую хим. коммуну. 72:334–346.

Загружено [Mount Allison University 0Libraries] в 02:04, 04 сентября 2014 г.

Исследования натуральных продуктов

739

Канг К., Ли Х.Дж., Ким С.И., Ли С.Б., Тунсаг Дж., Батсурен Д., Нхо К.В. 2007. Химиопрофилактические эффекты Saussurea salicifolia за счет индукции апоптоза и фермента детоксикации фазы II. Биол Фарм Бык. 30:2352– 2359. Кокоска Л., Яновска Д. 2009. Химия и фармакология левзеи сафлоровидной: обзор. Фитохимия. 70:842–855. Sedla´k E´, Boldizsa´r I, Borsodi L, Fu¨zfai Zs, Molna´r-Perl I, Preininger E´, Gyurja´n I. 2008. Идентификация и количественная оценка лигнанов, карбоновых кислот и сахаров в листьях Виды и сорта форзиции. Хроматография. 68:С35–С41. Сокол-Борсоди Л., Соломвари А., Молнар-Перл И.